数据标准化
一般建议PMT电压优化最大化任何新的流式细胞术测定的性能。然而,从获得的电压设置初始voltration应该只作为基线后重复试验时在纵向研究或试验执行在不同的乐器。标准化实验运行之间的数据(或仪器)明亮的荧光多色珠子或整除生物参考样本(如冷冻PBMC从健康捐献者)用于校准测量信号强度在每个探测器。简而言之,遵循以下步骤:
- 执行初始电压优化(最好是使用实际的实验样本)最大化分析性能。
- 运行亮珠(或参考样品)与这些基准电压和记录每个通道的荧光强度。这些都是你的目标在所有后续试验重复值。
- 未来在每个实验中,先运行校准珠子和调整PMT电压根据需要获取目标的价值观。这最小化数据波动由于日常仪器性能的差异。
- 注意,这不会消除批量样品制备、染色效果
- 运行试验,记得包括所有相关的控制。
附加信息:
- Kalina et al。(2012) EuroFlow流式细胞分析仪仪器设置和immunophenotyping标准化协议。白血病。26:1986 - 2010,doi: 10.1038 / leu.2012.122
- Spherotech校准粒子技术报告
