典型的流式细胞分析仪仪器使用光电倍增管(pmt)来检测样品的荧光。最初的信号(光撞击探测器)是放大在PMT来提高测量的灵敏度和分辨率。最后的信号强度数据所示情节因此不仅取决于实际的染色(利息)的标志的表达水平也在信号放大的程度。信号放大由PMT电压控制和在大多数仪器这个用户可调设置应该优化分别为每一个荧光团(探测器)在你的试验(可能是在光学显微镜相比,如曝光时间)。

• 太低PMT电压→模糊信号高数据传播,从背景不好看
• 过高PMT电压→明亮的信号的检测的线性范围
• 最优PMT电压→分离阴性和阳性之间的最大化和实验样品保留在线性范围

在简单化验PMT电压可以调节简单的视觉检查正面和负面的人群之间的适当分离,同时确保信号保持在线性范围。在更复杂的情况下,它是有利于优化电压试验性能最大化。这是最好通过运行彩色生物样品(或明亮的荧光多色珠子)增加电压间隔为每个探测器和计算分离指数(见Ab滴定数学公式)在每个设置阴性和阳性之间;这是通常被称为电压或voltration走。

附加信息:

• 瞿婉明和猪脚(2006)流式细胞术控制,仪器设置,和积极的决心。血细胞计数一次。69:1037 - 1042,doi: 10.1002 / cyto.a.20333
• 电压优化的文章BiteSizeBio

图1所示。voltration实验使用消极的混合物和FITC-labeled珠子优化PMT电压。最优电压范围(黄色突出显示)给最大种群之间的分离,同时保留所有的信号在线性检测范围。